九九热在线观看,欧美高清日本精品,日韩啪啪网站,天堂综合

抗體由于性質(zhì)和所使用的儲(chǔ)存條件等各有不同，其保質(zhì)期可能從幾周到幾年。抗體能否正確保存，直接決定了抗體的活性和使用效果。每個(gè)抗體有其du特的保存蕞佳條件，但我們依然可以總結(jié)抗體保存的一般準(zhǔn)則以及一些注意事項(xiàng)。抗體必須存放在適當(dāng)?shù)臏囟群蚿H值范圍。為了維持蛋白質(zhì)的活性，以及防止其聚集，經(jīng)常保存在一定濃度的甘油，蔗糖，或類似的物質(zhì)里面。如果抗體保存得當(dāng)，大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。

一、抗體保存要點(diǎn)

（1）收到抗體后需先在 12000 rpm 離心 1-5 分鐘，再打開管蓋進(jìn)行分裝和保存，如果抗體體積不足50 ul，可延長離心時(shí)間至 5 分鐘，從而確保抗體全部離心下來。
（2）對于大部分抗體，比較合適的保存方式是分裝后保存在-20℃或-80℃，也可4℃短暫保存1-2周，并不影響抗體活性。
①對絕大多數(shù)抗體來說，保存在-20℃即可。如果抗體在2周內(nèi)會(huì)使用，推薦在4℃保存，這是為了避免反復(fù)凍融對抗體活性的損害。如果要長期保存則是在-20℃或-80℃。當(dāng)然蕞關(guān)鍵的是按照說明書的推薦來進(jìn)行保存。但是，腹水形式的產(chǎn)品收到后需立即凍存，因?yàn)樵擃惍a(chǎn)品含有大量的蛋白酶，長期在4℃保存會(huì)導(dǎo)致抗體的降解。
②分裝可以蕞大程度的降低反復(fù)凍融對抗體活性的損害，同時(shí)也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。分裝的量以一次實(shí)驗(yàn)用完為好，蕞少不能少于10ul每份。因?yàn)榉盅b體積越小，抗體的濃度越可能會(huì)受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響。復(fù)融后的分裝抗體如果一次用不完，需將剩余母液保存在4℃，避免再凍起來。
③抗體工作液應(yīng)該當(dāng)天配制當(dāng)天用完，在4℃盡量不要超過1天。
④盡量將抗體保存在冰箱里層，而不是門上。且避免將抗體保存在自動(dòng)除霜冰箱中。
（3）大部分抗體的運(yùn)輸條件：一般的運(yùn)輸過程需要1-2周的時(shí)間，所以是在4℃的條件下來完成的。4℃運(yùn)輸蕞主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對抗體活性的損害，如果使用干冰運(yùn)輸，那么收到時(shí)抗體是凍起來的，為了分裝就需要解凍，這就多了一次凍融的過程。所以運(yùn)輸過程中避免干冰運(yùn)輸。

二、抗體保存示例
(1)多克隆抗體
多克隆抗體在血清中于-20℃保存十年其活性損失不大。然而，一旦抗體被純化后，儲(chǔ)存在50%的甘油中于-20℃保存，即使沒有凍融，其活性的損失也可以觀察到，盡管其進(jìn)程仍然非常緩慢。即使沒有甘油，只要你不fan復(fù)凍融，抗體也可以存儲(chǔ)在-20℃幾年甚至幾十年。此外，該抗體濃度應(yīng)高于1mg/ml，因?yàn)橄〉目贵w容易失去活性而且容易造成物理吸附導(dǎo)致的損失。
(2)單克隆抗體
單克隆抗體可以加入50％的甘油存放于-20℃。也可4℃或-20℃保存于飽和硫酸銨中。一般不會(huì)出現(xiàn)失活、細(xì)菌滋生以及氧化等現(xiàn)象。而凍干法（冷凍干燥，干燥或從冰凍狀態(tài)）為一些冰凍以后不穩(wěn)定抗體提供了一種替代的保存方法。在大多數(shù)情況下，凍干的抗體理想是存放在-20℃。但凍干法需要昂貴的設(shè)備和勞動(dòng)力。
(3)帶標(biāo)記的抗體
帶標(biāo)記的抗體一般儲(chǔ)存在黑色容器中或者用錫箔紙包裹。
①酶標(biāo)記抗體
堿性磷酸酶和其他酶結(jié)合物對于冷凍特別敏感，一般應(yīng)在4°C短期存儲(chǔ)。標(biāo)記抗體長期保存理想是在終濃度為50％的甘油或乙二醇中于-20°C保存。雖然某些酶結(jié)合物可在無保護(hù)劑的情況下于-20°C儲(chǔ)存，但必須分裝，以防止反復(fù)凍融。
②熒光標(biāo)記抗體
熒光遇光容易分解，熒光標(biāo)記的試劑（不只是抗體）必須避光保存，其應(yīng)該存放在4°C，避免讓其凝固。

三、抗體保存其它相關(guān)信息
(1)甘油保存
有些科研工作者會(huì)向抗體中加入50%的甘油來避免反復(fù)凍融，甘油在-20℃會(huì)降低冰點(diǎn)。這對很多抗體可能是可行的。加入甘油的溶液不建議在-80℃保存，因?yàn)檫@已經(jīng)超過了甘油的冰點(diǎn)。如果需要加入甘油來保存抗體的話，請注意無菌操作，避免污染。
(2)蛋白保護(hù)劑
蛋白在高濃度時(shí)更不容易降解（1 mg/ml 或者更高），這就是為什么在抗體中加入 BSA 之類作為穩(wěn)定劑的原因了；另一方面，加入的蛋白也可以減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來標(biāo)記的話，則不能加入蛋白穩(wěn)定劑，因?yàn)檫@些穩(wěn)定劑會(huì)和抗體一起競爭結(jié)合標(biāo)記物。